Выявление ферментативной активности

Выявление ферментативной активности

После окончания электрофоретического разделения крахмальный гелевый блок извлекают из гелевой кюветы и разрезают в горизонтальной плоскости с помощью натянутой тонкой металлической проволоки или же нейлоновой нити на две равные части. Обычно красят (выявляют ферментативную активность) только нижнюю часть продольно разрезанного крахмального блока, а верхнюю часть -откидывают. Однако, если исследователь пытается определить в исследуемых гемолизатах групповой полиморфизм еще какой-нибудь другой ферментной системы, то в таком случае используют обе половины разрезанного геля. Выявление ферментативной активности Состав инкубационных сред и ход цветных биохимических реакций, используемых для выявления активности тех или иных изоферментов, подробно излагается при рассмотрении каждой конкретной ферментной системы. Техника определения (принцип в разделе 2. Техника определения (принцип в разделе 2. 121) по G Radam и Н Strauch (1966) Метод горизонтального электрофореза в крахмальном геле.

Гелевый буфера 0,012 М фосфатный буфер, pH 6,0: 15,8 г КН2Р04 и 6,2 г Na2HP0412Н20 доводят до объема 1000 мл дистиллированной водой. Перед употреблением этот исходный раствор разводят дистиллированной водой в соотношении I : 10. Электродный буфер — 0,4 М нитратный буфер, pH 6,0: 105,5 г цитрата натрия -2Н20 И 8,6 г лимонной кислоты Н20 доводят до объема 1000 мл дистиллированной водой. На анодных ваннах используют неразведенный электродный, буфер, а на катодных ваннах — электродный буфер в разведении 1 :4 дистиллированной водой. Для внесения проб в гель крахмала используют кусочки, плотной бумаги фирмы Ватман № 17 или фирмы Шлейхер и Шюлль № 2727.

Электрофорез проводят при градиенте напряжения 5—6 В/см-1 в течение 14—18 ч в условиях холодильника или при комнатной температуре с охлаждением проточной циркулирующей водой.

Родители должны контролировать контент своего ребенка. Для этого можно настроить программу контроля. Недоступным контентом для подростков должны стать такие запросы, как “Синие киты”, Фото эротика , порнография.

Оставить комментарий

Почта (не публикуется) Обязательные поля помечены *

Вы можете использовать эти HTML теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите самый большой кружок: